真菌格莫瑞六亞甲基四胺（Gomori’s Methenamine Silver；GMS）銀染試劑盒-原理性說明書參考

HEPENGBIO真菌格莫瑞六亞甲基四胺（Gomori's Methenamine Silver；HEPENGBIO）銀染試劑盒
產品說明書（中文版）
 
主要用途
 
HEPENGBIO真菌格莫瑞六亞甲基四胺（Gomori's Methenamine Silver；HEPENGBIO）銀染試劑是一種旨在使用銀離子的醛基還原反應技術，識別各種涂片或存檔中的石蠟包埋組織切片中棕黑色染色的真菌細胞的權威而經典的技術方法。該技術經過精心改良傳統格莫瑞（Gomori）方法、成功實驗證明的。廣泛用于各種真菌菌株（例如aspergillosis和pneumocystis）的染色等。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩定，顯色清晰。
 
技術背景
 
真菌的細胞壁含有粘多糖（mucopolyssachride）成分，氧化后，釋放出醛基（aldehyde group），與銀離子反應，使銀離子還原為黑色金屬銀，產生金黃色的背景下，棕黑色的真菌細胞。  
 
產品內容
 
HEPENGBIO清理液（Reagent A）  毫升
HEPENGBIO固著液（Reagent B）  毫升
HEPENGBIO氧化液（Reagent C）  毫升
HEPENGBIO強化液（Reagent D）     毫升
HEPENGBIO染色液（Reagent E）       毫升
HEPENGBIO置換液（Reagent F）  毫升
HEPENGBIO穩定液（Reagent G）  毫升
產品說明書  1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里；HEPENGBIO染色液（Reagent E）避免光照；HEPENGBIO氧化液（Reagent C）具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證3月
 
用戶自備
 
恒溫培養箱或恒溫水槽：用于樣品反應孵育
蓋玻片：用于切片封片
中性樹脂：用于切片封片
光學顯微鏡：用于切片染色后觀察分析
 
 
 
實驗步驟
 
1． 準備好真菌涂片或4微米厚的石蠟切片脫蠟處理
2． 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
3． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
4． 小心加上xx微升HEPENGBIO固著液（Reagent B）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
5． 室溫下孵育15分鐘
6． 小心移去切片上的HEPENGBIO固著液（Reagent B）
7． 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
8． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
9． 小心加上xx微升HEPENGBIO氧化液（Reagent C）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
10． 室溫下孵育60分鐘
11． 小心移去切片上的HEPENGBIO氧化液（Reagent C）
12． 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
13． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
14． 重復實驗步驟12至13二次
15． 小心加上xx微升HEPENGBIO強化液（Reagent D）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
16． 室溫下孵育1分鐘
17． 小心移去切片上的HEPENGBIO強化液（Reagent D）
18． 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
19． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
20． 重復實驗步驟18至19二次
21． 小心加入xx微升HEPENGBIO染色液（Reagent E）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
22． 放進50℃恒溫培養箱孵育60分鐘，或直至出現棕色（注意：避免干枯）
23． 小心移去HEPENGBIO染色液（Reagent E）
24． 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
25． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
26． 重復實驗步驟24至25二次
27． 小心加上xx微升HEPENGBIO置換液（Reagent F）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
28． 室溫下孵育1分鐘，或直至出現灰色
29． 小心移去切片上的HEPENGBIO置換液（Reagent F）
30． 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
31． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
32． 重復實驗步驟30至31二次
33． 小心加入xx微升HEPENGBIO穩定液（Reagent G）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
34． 室溫下孵育3分鐘 
35． 小心移去HEPENGBIO穩定液（Reagent G）
36． 小心加入xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
37． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
38． 重復實驗步驟36至37一次
39． （選擇步驟）復染處理 （建議使用HEPENGBIO淡綠（LIGHT GREEN）復染試劑盒——HEPENGBIO80091）
40． 即刻放上蓋玻片或封片（中性樹脂）
41． 在一般光學顯微鏡下觀察：
 
注意事項
 
1． 本產品為50次操作
2． 操作時，須戴手套
3． HEPENGBIO氧化液（Reagent D）具有腐蝕性，注意操作安全
4． HEPENGBIO氧化液（Reagent D）出現明顯棕色，須更換后使用
5． 每次更換試劑溶液時，保持切片面基本晾干
6． 試劑溶液在切片表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿切片表面
7． 整個操作，在避光狀態下進行
8． 染色完成后，即刻進行光學顯微鏡觀察 
9． 樣品染色后保存，避免光照
10． 染色容易過度，注意觀察背景顏色，控制操作時間
11． 本公司提供系列微生物染色試劑產品